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如何正確使用美國PE色譜柱?
  • 發(fā)布日期:2021-07-27      瀏覽次數:1017
    •   美國PE色譜柱的正確使用包含:加裝保護柱,過(guò)濾流動(dòng)相和樣品,凈化樣品,避免過(guò)高的柱壓等。
       
        美國PE色譜柱加裝保護柱的作用是過(guò)濾掉來(lái)自流動(dòng)相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時(shí)也可以有效除去流動(dòng)相和樣品中的不溶物。盡管現在的色譜儀在流動(dòng)相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污然,因此,加裝保護柱是必要的,特別是在分析中藥、中成藥等復雜混合物和生物樣品時(shí)更是保護分析柱*的措施。保護柱填料應與分析柱一致,粒徑可較分析柱大。保護柱屬消耗品,經(jīng)過(guò)一定次數的樣品分析后,出現柱壓顯著(zhù)升高或峰形變壞或基線(xiàn)漂移時(shí),應考慮更換保護柱。
       
        過(guò)濾流動(dòng)相和樣品:流動(dòng)相通常由水或緩沖溶液與有機溶劑混合而成,原則上,所有經(jīng)過(guò)色譜柱的流動(dòng)相均應過(guò)濾,但在實(shí)際操作上應視具體情況而有所區別:當有機溶劑用色譜純級,水用石英亞沸水或其它超純水時(shí),在能確保水和有機溶劑的質(zhì)量且沒(méi)有受到污染時(shí),過(guò)濾并無(wú)更多實(shí)際意義。當流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí),則過(guò)濾是必要的,如前所述,當緩沖溶液放置一段時(shí)間后,在使用前還應重新過(guò)濾。裝流動(dòng)相的容器和色譜系統中的在線(xiàn)濾器要定期清洗和更換,以避免濾器因過(guò)載而起不到過(guò)濾作用。
       
        凈化樣品:當樣品中含有對色譜柱有損害的化學(xué)成分,如產(chǎn)生長(cháng)久性吸附的蛋白質(zhì)、糖等有機分子和強吸附性物質(zhì),以及可能對柱填料產(chǎn)生破壞作用的基團離子。在進(jìn)樣前應盡可能對樣品進(jìn)行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分。
       
        避免過(guò)高的柱壓:雖然美國PE色譜柱能耐受的壓力可達高,但過(guò)高及過(guò)大的壓力變化均會(huì )縮短色譜柱的壽命,避免的方法是柱壓過(guò)高時(shí),盡可能采用較小的流速,以不超過(guò)柱最大允許壓力的一半為宜。當流速較大時(shí),應采取流速梯度的辦法使流速分步到位。使用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí),進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則超過(guò)20%的壓力沖擊會(huì )很快使柱報廢。當使用多柱聯(lián)用時(shí),柱切換要避免在高壓下進(jìn)行。
       
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